重组人生长激素受体胞外段及其突变体S201C

• 作者: 王柏军 郭艳红
• 来源期刊: 咸宁学院学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 人生长激素受体细胞外段 人生长激素 突变体 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 16-19
• 页数: 4页
• 分类号: R335
• 字数: 2728字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0635.2008.01.006

摘要

目的 研究重组人生长激素受体胞外段(rhGHRECD)与人生长激素(hGH)结合动力学.方法 用定点诱变PCR法获得rhGHRECD突变体S201C碱基序列.将测序正确的质粒pET20b(+)-hGHRECD、rhGHRECD(S201C)转入BL21(DE3)表达,纯化得到蛋白.采用放免分析法测定rhGHRECD、rhGHRECD(S201C)蛋白与hGH的结合解离常数(Kd);采用BIAcore检测rhGHRECD(S201C)与hGH的结合动力学.结果 放免测得KdWT=1.879×10-10 M、KdS201C=1.937×10-10 M;BIAcore 测得结合速度(Kon)= 3.2 ×105 (M-1·s-1), 解离速度(Koff)= 3.9 ×10-5 (s-1),Kd=1.220 ×10-10M.结论 rhGHRECD、rhGHRECD(S201C)与商品化的hGH具有极高的结合能力;rhGHRECD、rhGHRECD(S201C)与hGH结合,具有同样高的亲和力;rhGHRECD(S201C)可锚定于BIAcore芯片上,实时检测重组的hGH Site1与受体结合的动力学变化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王柏军	咸宁学院医学院生理学教研室	1	0	0.0	0.0
2	郭艳红	武汉大学医学院生理学系	2	2	1.0	1.0