白血病细胞系中抑癌基因PTEN启动子区甲基化状态检测及其去甲基化研究

• 作者: 刘向荣 刘航 徐智芳 李敏 王建祥 王敏 王洋 饶青
• 来源期刊: 中华血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白血病 基因,PTEN 甲基化 特异性聚合酶链反应 5-氮-2'-脱氧胞苷
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 289-292
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 3501字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-2727.2008.05.001

摘要

目的 探讨抑癌基因PTEN表达沉默的机制及诱导PTEN表达对白血病细胞的作用.方法 应用甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation specific PCR,MSP)检测白血病细胞系HL-60、Nalm-6、Raji、KG-1a、U937、NB4、K562中PTEN基因启动子区域甲基化状态;用甲基化转移酶抑制剂5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理白血病细胞,MSP检测甲基化状态的改变、RT-PCR检测PTEN mRNA水平的改变、瑞特染色观察细胞形态学改变、膜联蛋白V/碘化丙锭(Annexin V/PI)标记染色检测细胞凋亡.结果 检测的白血病细胞系中HL-60、Nalm-6、Raji、KG-1a、U937细胞PTEN基因显示超甲基化状态,而NB4和K562细胞显示低甲基化状态;5-Aza-CdR处理HL-60和Nalm-6细胞后,PTEN基因甲基化降低、mRNA表达水平则逐渐增高,并呈剂量依赖性,细胞出现凋亡现象.结论PTEN基因启动子区异常甲基化可能导致该基因转录表达失活或沉默,甲基化抑制剂可以诱导PTEN表达,并引起白血病细胞凋亡.