摘要:
目的 研究人骨髓来源间充质干细胞对新生大鼠高氧肺损伤的干预作用.方法 采用贴壁选择法分离、培养、扩增hMSCs,并予BrdU进行标记;32只3日龄SD大鼠随机分为A、B、、C、D4组,每组8只;A组:高氧暴露+hMSCs注射组,B组:空气暴露+hMSCs注射组,C组:高氧暴露对照组,D组:空气暴露对照组.A、C组:高氧(95%)暴露后7 d,腹腔分别注射含5×105 MSC的磷酸盐缓冲液(PBS)、单纯的PBS 50 μl,B、D组:空气暴露后7 d,腹腔分别注射含5×105 hMSCs的PBS、单纯的PBS 50 μl.注射后3 d处死全部动物取肺组织,ELASA法检测肺组织匀浆TNFα、TGFβ1水平;免疫组织化学方法检查肺组织BrdU积分情况,HE染色观察肺组织学形态学结构,做辐射状肺泡计数(RAC);RT-PCR方法检测各组肺组织Alu序列表达情况.结果 (1)A、B、C、D 4组TNFα水平分别为142.933±24.017,79.033±11.573,224.088±41.915,76.500±10.373(F=59.970,P=0.000);而TGFβ1水平分别为1726.484±91.086,1530.359±173.441,2047.717±152.057,1515.777±131.049(F=24.977,P=0.000).(2)RAC值分别为11.145±1.331,13.941±0.985,9.595±0.672,14.819±1.080(F=43.234,P=0.000).(3)RT-PCR检测显示A、B组均有Alu序列表达,而C、D组均未见Alu序列表达.免疫组织化学显示A、B组均有BrdU阳性染色细胞,BrdU积分分别为0.230±0.026,0.190±0.015,t=3.769,P=0.002;C、D组均未见阳性染色细胞.结论 新生大鼠腹腔注射hMSC后肺组织有hMSCs定植,且与暴露的条件相关;hMSCs可改善新生大鼠因高氧引致的肺组织损伤.