牛生长激素基因工程菌的构建及其诱导表达

• 作者: 刘孟洲 李明 王凤云 石晓卫 赵巧辉 陈其新
• 来源期刊: 河南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛生长激素 蛋白质 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医学
• 页码范围: 643-645,654
• 页数: 4页
• 分类号: S823
• 字数: 3121字
• 语种: 中文

摘要

为获得牛生长激素(BST)蛋白,构建了工程菌并进行了诱导表达.先设计2对引物,从pUCm-T-BST克隆中扩增出BST成熟蛋白编码序列,双酶切后分别插入表达载体(pET30a和pET29a),转化E.coli DH5α并进行阳性克隆鉴定;再将重组质粒分别转化到E.coli BL21(DE3)和RosettaTM(DE3)pLysS中,构建BST原核工程菌;最后进行诱导表达.结果表明,重组表达载体pET30a-BST和pET29a-BST中均插入了正确的目的基因;经IPTG诱导后,以BL21(DE3)为宿主的工程菌无目的蛋白表达,而pET30a-BST/RosettaTM和pET29a-BST/RosettaTM分别可见分子量约29.5,26.5 kD的融合蛋白表达,约占菌体蛋白的26%,35%.说明稀有密码子限制BST基因在E.coli中的表达,选择适宜的宿主菌可克服此障碍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李明		76	525	11.0	19.0
2	刘孟洲		64	347	9.0	15.0
3	陈其新		31	114	7.0	8.0
4	王凤云		14	127	6.0	11.0
5	石晓卫		5	21	3.0	4.0
6	赵巧辉		8	48	4.0	6.0