凝胶阻滞试验分析铜绿假单胞茵LexA蛋白与其靶位点的特异性结合

• 作者: 刘芳 唐晖 查庆兵 汤绍辉 陈炫
• 来源期刊: 暨南大学学报(自然科学与医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 铜绿假单胞菌 SOS反应 阻遏蛋白(LexA) 结合位点
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 临床医学
• 页码范围: 381-384,395
• 页数: 5页
• 分类号: Q786|R378.99
• 字数: 3237字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-9965.2008.04.012

摘要

目的:分析铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginoso,,PA)的LesA与其靶位点的特异性结合的特性.方法:以PCR法扩增PA的LexA基因,将其克隆于原核表达载体pET-22b(+),转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,采用镍离子亲合柱层析和Superdex-75凝胶过滤层析分离和纯化目的蛋白,以含推定LexA结合位点的片段CTGTN27ACAG为探针,用凝胶阻滞试验检测LexA蛋白与探针序列结合的能力及特异性.结果:构建了pET22b-LexA重组质粒,IPTG诱导目的蛋白表达率约为25%,获得纯度大于95%的目的蛋白;CTGTN27ACAG能与LexA蛋白发生特异性结合.结论:推定Lex4结合位点CTGTN27ACAG能与PA的LexA蛋白特异性结合,可能是LexA蛋白的结合靶位点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汤绍辉	暨南大学附属第一医院临床实验中心	164	444	9.0	14.0
2	刘芳	暨南大学附属第一医院临床实验中心	44	201	7.0	12.0
3	查庆兵	暨南大学附属第一医院临床实验中心	28	71	4.0	7.0
4	陈炫	暨南大学附属第一医院临床实验中心	13	59	4.0	7.0
5	唐晖	暨南大学附属第一医院临床实验中心	12	47	4.0	6.0