铜绿假单胞菌LexA蛋白在大肠杆菌中的表达与纯化

• 作者: 何晓梅 光丽霞 周世文 张克斌 钱桂生
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 铜绿假单胞菌 LexA蛋白 基因克隆 蛋白表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 410-413,418
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3938字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2006.05.007

摘要

目的克隆铜绿假单胞菌PAO1株的LexA蛋白编码区,在大肠杆菌中表达并纯化表达蛋白.方法提取铜绿假单胞菌PAO1株基因组DNA,PCR扩增LexA蛋白编码区,A-T克隆于质粒pMD 18-T载体中,阳性重组子经酶切后,回收目的片段连接至相应线性化的表达型载体pET-28a(+)中,重组质粒经测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21感受态,筛选高效表达株,表达产物经SDS-PAGE初步鉴定后,用镍珠吸附一步法纯化,表达蛋白转印PVDF膜后,经N-端测序证实.结果本研究成功克隆到PAO1株的LexA蛋白编码区并在大肠杆菌中获得表达,纯化表达蛋白经N-端测序证实确为PAO1的LexA蛋白.结论研究结果为铜绿假单胞菌PAO1株基因组中SOS盒的实验鉴定及LexA蛋白调控基因的筛选奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱桂生	第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所	591	5662	33.0	52.0
2	光丽霞	第三军医大学附属新桥医院医学实验技术中心	18	49	3.0	6.0
3	张克斌	第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所	29	184	7.0	13.0
4	周世文	第三军医大学附属新桥医院医学实验技术中心	32	375	9.0	18.0
5	何晓梅	第三军医大学附属新桥医院医学实验技术中心	9	30	3.0	5.0