鸡β-防御素-1基因(Gal-1)在大肠杆菌中的融合表达与纯化

• 作者: 张辉华 曹永长 杜礼琴 毕英佐 马静云
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 鸡防御素-1(Gal-1) 融合表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2006,（9）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 9-12
• 页数: 4页
• 分类号: S8
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-6005.2006.09.003

摘要

内源性抗菌多肽防御素是机体先天性免疫系统的重要组成部分,可帮助机体防御外界病原微生物的入侵.鸡β-防御素-1(Gallinacin-1,Gal-1)对许多致病菌都具有杀菌作用,具有很好的研究开发价值.本研究利用PCR技术从重组质粒pGEM-T Easy-gal-1中克隆出Gal-1基因成熟肽区,将该基因插入原核表达载体pET-32a(+)中,构建重组质粒pET-32a(+)-gal-1,然后用重组质粒转化大肠杆菌BL-21.挑选阳性克隆菌,用浓度为0.5 mmol/L的IPTG进行诱导表达.SDS-PAGE电泳显示在目标位置约25kD处出现了条带并用Werstern Blot进行了鉴定.表明Gal-1基因在大肠杆菌以融合形式得到了表达.经灰度扫描显示重组蛋白表达量占细菌总蛋白的15.54%.用50%Ni-NTA纯化树脂进行层析纯化,在洗脱液E中出现单一条带.Gal-1多肽在pET-32a(+)质粒表达体系中成功表达为鸡防御素多肽下一步的研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毕英佐	华南农业大学动物科技学院	216	2631	28.0	41.0
2	曹永长	华南农业大学动物科技学院	111	1387	20.0	31.0
3	马静云	华南农业大学动物科技学院	87	548	13.0	19.0
4	张辉华	华南农业大学动物科技学院	54	325	9.0	16.0
8	杜礼琴	华南农业大学动物科技学院	2	28	2.0	2.0