表达鸡传染性喉气管炎病毒GB基因重组鸡痘病毒转移载体的构建

• 作者: 单虎 王晓丽 田夫林 邵卫星
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡传染性喉气管炎病毒 糖蛋白GB基因 重组鸡痘病毒 转移载体
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 27-30
• 页数: 4页
• 分类号: S8
• 字数: 2678字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2008.06.013

摘要

根据文献设计2对引物,PCR扩增FPV复制非必需区中外源基因插入位点两侧翼的片段,分别克隆到pUC19和pSK质粒中,并命名为pFP1和pFP2.根据文献设计引物,PCR扩增鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)的GB基因的编码区.将GB基因克隆到质粒pFP1中获得重组质粒pFP1-GB;用酶切质粒pEGFP,得到GFP片段并克隆到质粒pFP2中,得到重组质粒pFP2-GFP.双酶切pFP1-GB得到FP1-GB片段,并克隆到质粒pFP2-GFP中,得到重组质粒pFP1GB-FP2GPF.酶切质粒pE/L-7.5,获得背向连接的2个鸡痘病毒启动子片段--PE/L-7.5,并将该片段克隆到重组质粒pFP1GB-FP2GPF获得重组质粒pGB-GFP,该质粒即为鸡痘病毒的转移质粒.在质粒pGB-GFP中,2个背向连接的启动子被克隆到的GB和GFP基因之间,分别启动GB和GFP基因的表达.经酶切和测序鉴定pGB-GFP,启动子PE/L和P7.5已分别正确地插入到GB和GFP基因之间,分别启动外源表达基因GB和筛选标记基因GFP的表达,从而证明已获得表达鸡传染性喉气管炎病毒GB基因重组鸡痘病毒转移载体pGB-GFP.该载体为下一步获得表达鸡传染性喉气管炎病毒GB基因的重组鸡痘病毒奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	单虎		183	631	12.0	17.0
2	田夫林		29	519	13.0	22.0
3	邵卫星		17	150	7.0	12.0
4	王晓丽		6	59	3.0	6.0