鸡传染性喉气管炎病毒河南株gB基因真核表达载体的构建及表达

• 作者: 吕小丽 崔保安 杨明凡 王东方 王振亚 管倩 郭小参 陈红英
• 来源期刊: 江西农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡传染性喉气管炎病毒 gB基因 真核表达载体 表达
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 动物科学与动物医学
• 页码范围: 798-802
• 页数: 5页
• 分类号: S831.7
• 字数: 3508字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2286.2009.05.004

摘要

根据已发表的传染性喉气管炎病毒(ILTV)gB基因序列,设计并合成1对引物,以河南分离株(ILTV-HN)接种10日龄鸡胚,从含痘斑的绒毛尿囊膜中提取基因组DNA扩增gB基因,将扩增片段克隆入pGEM-T Easy载体后,经蓝白斑筛选,菌液PCR和酶切鉴定为阳性的重组菌进行测序,结果表明克隆到ILTV-HN株gB基因,全长为2 629 bp,包含一个完整的开放阅读框.然后将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建真核表达载体pcDNA3.1-gB,转染鸡胚成纤维细胞(CEF),通过RT-PCR检测,转染细胞中含gB基因的mRNA,间接免疫荧光检测,结果表明gB基因在CEF细胞中进行了瞬时表达.