Livin异构体特异性shRNA对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响

• 作者: 于利利 王泽华
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Livin基因 短发夹RNA 宫颈癌 凋亡
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 228-232
• 页数: 5页
• 分类号: R737.33|R730.54
• 字数: 3485字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2008.03.006

摘要

目的:应用构建成功的Livin异构体(BIRC71,BIRC72)短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体转染Hela细胞,探讨其对Livin基因的沉默效应及诱导Hela细胞凋亡的作用.方法:采用脂质体转染法转染Hela细胞,荧光实时定量PCR、Western blotting检测转染前后宫颈癌Hela细胞Livin基因拷贝数和蛋白表达的变化,将shRNA表达载体流式细胞术检测不同时间(24、48、72 h)的细胞凋亡率.结果:真核表达载体的转染效率48 h较24、72 h高;转染pGenesil-1-BIRC71、pGenesil-1-BIRC72后Hela细胞中Livin拷贝数明显减少(P<0.05),蛋白质表达水平显著降低(P<0.05);流式细胞术检测24、48、72 h凋亡率,转染Livin shRNA组细胞的凋亡率显著高于对照组(P<0.05),随时间延长(24→72 h)凋亡率相应增加.结论:靶向Livin的shRNA真核表达载体可以有效特异地阻断Livin基因的表达,明显诱导宫颈癌细胞凋亡.