基于SFV RNA复制子核酸疫苗pIRSFV-HN的构建及其体内外抑瘤作用

• 作者: 佟敬山 刘立明 张钰 朱继红 李昌 李群 李霄 金宁一 陈勇志 陈漉
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 塞姆利基森林病毒 RNA复制子 新城疫病毒 核酸疫苗 结肠癌 抑瘤作用 细胞毒性T淋巴细胞
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 20-24
• 页数: 5页
• 分类号: R735.3|R730.5
• 字数: 3826字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2008.01.005

摘要

目的:构建基于塞姆利基森林病毒(Semliki forest virus,SFV)RNA复制子和新城疫病毒HN基因的核酸疫苗pIRSFV-HN,并探讨其体内外的抑瘤作用.方法:基于SFV RNA复制子和新城疫病毒HN基因构建核酸疫苗pIRSFV-HN,pIRSFV-HN转染人结肠癌细胞HCT-116,以Western blotting检测转染后HCT-116细胞HN的表达水平,以AO/EB双荧光染色检测肿瘤细胞的凋亡,以MTT法检测疫苗对HCT-116细胞增殖的抑制.构建C57BL/6小鼠右后肢皮下荷H22腹水瘤细胞模型,瘤体内注射pIRSFV-HN(共3次),检测该小鼠血清IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ水平和特异性CTL活性.结果:成功构建基于SFV RNA复制子和新城疫病毒HN基因的核酸疫苗pIRSFV-HN.结肠癌细胞HCT-116被疫苗转染后可有效表达HN蛋白,对照细胞则无表达;转染后HCT-116细胞出现凋亡的征象;该细胞的增殖受到明显抑制,最大抑制率达55.34%.移植瘤体内注射疫苗后,荷瘤小鼠血清IL-2、IFN-γ水平显著升高(P＜0.05),其CTL活性也显著升高(P＜0.01).结论:基于SFV RNA复制子和新城疫病毒HN基因的核酸疫苗pIRSFV-HN在体外可有效地抑制肿瘤细胞;在体内可促使免疫趋向Th1优势,提高其抑瘤免疫水平.