RNA干扰人胃癌BGC-823细胞中DNA聚合酶β基因表达的初步研究

• 作者: 王蕾 董子明 赵国强
• 来源期刊: 中华肿瘤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: DNA聚合酶β siRNA 胃肿瘤 荧光定量PCR 流式细胞术
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 729-732
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 3680字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-3766.2008.10.003

摘要

目的 研究RNA干扰DNA聚合酶β(polβ)基因对人胃癌BGC-823细胞生物学行为的影响.方法 针对DNA polβ基因序列构建小干扰RNA(siRNA)真核表达载体,用脂质体介导转染人胃癌BGC-823细胞,G418筛选出稳定细胞株;采用荧光定量PCR和Western blot测定各组细胞的DNA polB mRNA和蛋白表达水平;用流式细胞术和裸鼠体内成瘤检测各组细胞的增殖情况.结果 成功构建了针对polβ基因的siRNA表达载体.转染pol β靶向siRNA的BGC-823细胞,其polβmRNA和蛋白表达水平均明显降低,且载体pRNAT-U6.l-sipoβ2(抑制程度83%)的沉默抑制作用强于载体pRNAT-U6.l-sipolβl(抑制程度56%);与无关siRNA对照组、空载体对照组和空白对照组相比,转染pRNAT-U6.1-sipellM的细胞G0/G1期比例显著升高,S期比例及细胞增殖速度显著下降(P<0.05);转染pRNAT-U6.l-sipolβ2的细胞C0/C1期比例显著降低,S期比例及细胞增殖率显著升高(P<0.05).结论 靶向DNA polβ的siRNA可以显著抑制polβ的表达;polβ的高表达和近乎完全抑制的超低水平表达都不利于维持细胞的生理状态;通过siRNA将BGC-823细胞中polβ表达沉默到合适的低水平,可能对肿瘤的生长起到抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵国强	郑州大学基础医学院微生物与免疫学教研室	245	807	11.0	16.0
2	董子明	郑州大学基础医学院病理生理学教研室	237	965	14.0	19.0
3	王蕾	郑州大学基础医学院病理生理学教研室	66	364	6.0	18.0