hTERT介导脐带间充质干细胞实现永生化的研究

• 作者: 刘振林 刘晓智 孙世中 孙洪涛 张赛 胡群亮
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脐带间充质干细胞 端粒酶逆转录酶催化亚单位 永生化
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 325-328
• 页数: 4页
• 分类号: R329.28
• 字数: 2934字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2008.04.001

摘要

目的 通过转染人端粒酶逆转录酶催化亚单位(hTERT)建立永生化脐带间充质干细胞(UCMSCs),用以获得足够多的UCMSCs满足体外研究与临床需要. 方法 原代分离培养人UCMSCs,取第4代UCMSCs行流式细胞术检测UCMSCs表面特异标志物表达:利用脂质体介导pLXSN-hTERT正义表达质粒转染UCMSCs,建立永生化UCMSCs:RT-PCR检测转染前后hTERTmRNA表达水平,细胞免疫荧光方法检测hTERT蛋白表达,流式细胞术观察hTERT转染后细胞周期改变. 结果 流式细胞术结果显示UCMSCs强表达CD29、CD44、CDl05,极低表达CD31、CD34、CD45,检测结果符合人UCMSCs特征;RT-PCR检测单纯UCMSCs低表达hTERT mRNA,pLXSN-hTERT正义表达质粒转染后hTERT mRNA表达明显增高;细胞免疫荧光显示hTERT全部表达于细胞核,转染后胞核荧光强度明显增强;细胞周期检测结果显示转染后处于S期UCMSCs数目明显增多,细胞可获得长期稳定传代(＞35代). 结论 以hTERT转染UCMSCs在体外可获得长期稳定传代培养细胞,可基本满足体外研究与临床需要.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张赛	武警医学院附属医院神经外科	109	1129	12.0	29.0
2	孙洪涛	武警医学院附属医院神经外科	25	112	7.0	9.0
3	胡群亮	武警医学院附属医院神经外科	12	63	5.0	7.0
4	刘振林	武警医学院附属医院神经外科	10	40	5.0	5.0
5	孙世中	武警医学院附属医院神经外科	6	29	4.0	5.0
6	刘晓智		1	3	1.0	1.0