缺刻缘绿藻总RNA提取方法的比较研究

• 作者: 周志刚 杜道海
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 缺刻缘绿藻 RNA提取 反转录聚合酶链式反应
• 年，卷（期）: 2008,（z2）
• 页码范围: 103-106
• 页数: 4页
• 分类号: Q813
• 字数: 3277字
• 语种: 中文

摘要

为了获得高质量的缺刻缘绿藻总RNA,采用CTAB法、TRIzol法和RNAplant法3种方法对该藻总RNA的提取效果进行比较分析.结果表明,采用CTAB法提取获得的总RNA产率最高,但因可能含有较多的蛋白质、多糖等杂质使得纯度最低;TRIzol法提取的总RNA纯度较CTAB法稍高,但产率最低,且仍含有DNA带;RNAplant法提取的总RNA电泳图清晰,OD260nm/OD280nm值为2.0,高于前2种方法,产率在2种方法之间,表明RNAplant法更适于缺刻缘绿藻总RNA的提取.对后者提取的总RNA,经反转录合成的cDNA产物大小在500 bp～2 kb,并能通过RT-PCR获得18 S rRNA基因的特异性片段,进一步说明利用RNAplant法可为基因克隆、表达分析等后续研究提供高质量的RNA.