水痘-带状疱疹病毒糖蛋白E在CHO细胞中的稳定表达

• 作者: JIN Yu-lan 俞宏杰 王灿珍 瞿爱东 陈哲文 黄海武
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 水痘-带状疱疹病毒 糖蛋白E CHO细胞 表达
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 654-657
• 页数: 4页
• 分类号: R511.5|Q786
• 字数: 3124字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2008.08.004

摘要

目的 在CHO细胞中稳定表达水痘一带状疱疹病毒(VZV)糖蛋白E(gE).方法 PCR扩增VZV gE完整胞外结构域编码基因,克隆至哺乳动物细胞表达质粒PSGHVO中,与DHFR选择性基因和脂质体共转染CHO/dhfr-细胞,筛选稳定分泌人生长激素(hGH)和gE融合蛋白的细胞株.采用ELISA和Western blot方法检测细胞培养上清中hGH和gE融合蛋白的表达,并用Ni2+-NTA柱进行纯化.结果 gE基因PCR扩增产物和重组表达质粒PSGHVO-gE的双酶切产物经琼脂糖凝胶电泳,均可见1 500 bp的目的 基因条带.转染PSGHVO-gE质粒和DHFR基因的细胞培养上清液经ELISA和Western blot,确认有重组蛋白表达,gE表达量约为20 mg/L;纯化后蛋白纯度约为90%.结论 已在CHO细胞中稳定表达了VZV gE蛋白,为制备VZV表面抗原奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈哲文		27	68	4.0	6.0
2	瞿爱东		25	25	2.0	3.0
3	JIN Yu-lan		1	1	1.0	1.0
4	黄海武		2	3	1.0	1.0
5	俞宏杰		1	1	1.0	1.0
6	王灿珍		1	1	1.0	1.0