人骨髓间充质干细胞体外扩增的生物学评估

• 作者: 丁浩强 付涌水 叶欣 夏文杰 张秀明 罗广平 许茹 邓晶 陈扬凯 项鹏
• 来源期刊: 中国实验血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 成骨 成脂 STR HLA
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 造血干细胞移植与相关基础
• 页码范围: 639-644
• 页数: 6页
• 分类号: R329.28|R73.35
• 字数: 5677字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-2137.2008.03.038

摘要

本研究旨在对骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)进行移植前增殖分化能力测定,病毒学检查,核型分析,PCR-STR和HLA的检测,以便为临床应用提供安全、可靠的移植细胞.采用贴壁法分离骨髓MSC,在相同条件下分别考察各代细胞形态、生长、表面标记、成骨、成脂分化能力的变化情况,并进行不同生长时期的核型分析,利用HLA-SBT技术检测4个不同供者来源的MSC的HLA-Ⅰ和HLA-Ⅱ位点的高分辨分型;应用PCR-STR技术检测4个不同供者来源的MSC基因遗传标记.并且利用ELISA方法检测HIV,HBV,HCV和TP,使用PCR方法检测支原体污染.结果表明:随着传代次数增加,MSC的增殖能力、成骨能力均有所下降.在扩增过程中,MSC始终保持较高的纯度,CD29、CD44、CD105、CD166、CD73均表达阳性,CD14、CD34、CD45、CD80和CD86均表达阴性.在8代以前未发现核型变异.4个不同供者来源的MSC的HLA高分辨分型和STR基因分型结果为MSC3的TP表达阳性,MSC2在5代出现支原体污染.结论:在体外培养过程中MSC干细胞特性逐渐丢失,其中向成骨方向的分化潜能降低.MSC在8代以前可作为实验研究及临床应用的良好对象.