可溶性血管内皮生长因子受体2片段的表达及其对血管内皮细胞增殖的影响

• 作者: 刘禄成 李哲 李然伟 王颂 高瑞娟
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 血管内皮生长因子受体2 血管生成 人脐静脉内皮细胞 鸡胚尿囊膜
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 85-89
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 4064字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2008.02.002

摘要

目的 探讨可溶性血管内皮生长因子受体2(sKDR)抑制血管内皮细胞增殖及在血管生成中的作用.方法 提取脐静脉内皮细胞(HUVEC)总RNA,扩增KDR基因膜外1～4 结构域, 构建原核表达载体pQE40-KDR,转化E.coli M15,经IPTG诱导表达,镍离子柱亲和层析纯化后复性,用Western blot检测sKDR蛋白的表达,MTT比色法和鸡胚尿囊膜(CAM)试验分别检测其对HUVEC增殖的影响及其对血管生成的作用.结果 经RT-PCR扩增得到了1 150 bp左右的sKDR片段,并在pQE40 原核表达系统中表达了sKDR蛋白,以包涵体形式存在.纯化后蛋白电泳呈现相对分子质量50 000左右的单一条带,纯化蛋白占总蛋白的98%,蛋白含量为80 μg/ml.Western blot证实其为重组sKDR蛋白.MTT检测结果显示,sKDR可抑制血管内皮生长因子(VEGF)刺激的HUVEC增殖,并阻滞VEGF诱导的CAM血管增生.结论 已成功构建sKDR原核表达载体,并在大肠杆菌M15中获得表达,纯化的sKDR片段具有与VEGF结合的生物学功能,有望成为基因治疗肿瘤血管形成的理想靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘禄成	吉林大学第二医院泌尿外科	72	219	7.0	10.0
2	王颂	吉林大学第二医院泌尿外科	24	49	3.0	5.0
3	李然伟	吉林大学第二医院泌尿外科	63	187	6.0	11.0