mRNA差异显示方法的建立及条件优化

• 作者: 孙俊红 杜秋香 王小伟 王英元 籍晓元
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 差异显示技术 锚定引物 随机引物 退火温度
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 289-292
• 页数: 4页
• 分类号: Q789
• 字数: 3845字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-6611.2008.04.001

摘要

目的 研究大鼠皮肤肌肉特异性基因的表达,探讨引物的不同、退火温度变化与扩增产物特异性之间的关系. 方法 12只健康雄性Sprague-Dawley大鼠分为正常对照组与实验组(挫伤4 h).分别提取总RNA,反转录成cDNA,通过不同引物、退火温度及反应体系进行PCR产物扩增,比较不同条件下差异条带的情况. 结果 总RNA量在2～4 μg时,扩增条带最亮;提高反转录温度有利于长片段cDNA的合成;使用TaKaRa公司带有T7启动子的Oligo dT12 NM和M13的随机引物时,可最大限度地减少非特异性条带;先使用低严谨的退火温度,再使用高严谨的退火温度可显著地增强差异条带重复性和敏感性. 结论 差异显示技术方法简便、灵敏、高效,适用于一般性的基因差异表达研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙俊红	山西医科大学法医学院病理学教研室	68	201	7.0	9.0
2	王英元	山西医科大学法医学院病理学教研室	165	902	15.0	21.0
3	杜秋香	山西医科大学法医学院病理学教研室	32	97	6.0	7.0
4	王小伟	山西医科大学法医学院病理学教研室	8	28	4.0	5.0
5	籍晓元	山西医科大学法医学院病理学教研室	6	10	2.0	2.0