海岛棉组培mRNA差异显示体系的建立

• 作者: 代鑫 曲延英 陈全家 高文伟
• 来源期刊: 新疆农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 海岛棉 差异显示PCR 体系建立
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 1728-1732
• 分类号: S562|S188
• 字数: 3231字
• 语种: 中文

摘要

[目的]建立适合海岛棉组织培养过程中差异基因表达研究的DDRT-PCR体系.[方法]试验选取海岛棉体胚发育过程中的胚性愈伤组织,无菌苗下胚轴为对照.对引物浓度、dNTP浓度、酶浓度和退火温度等影响差异显示PCR的关键因素进行单因素优化实验.[结果]确定了海岛棉组织培养差异显示PCR体系为(10 μL):cDNA 2 μL;dNTP 200 μmol/L;上游引物0.4 μL(10 μM),下游引物0.5 μL(10 μM);Taq酶0.5 U,Buffer1.0 μL.前5个循环退火温度为50℃,后30个循环退火温度为57.1℃.[结论]用该体系扩增,PCR产物特异性高,条带清晰,背景污染少.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曲延英	新疆农业大学农业生物重点技术实验室	135	726	13.0	19.0
2	代鑫	新疆农业大学农业生物重点技术实验室	2	12	1.0	2.0
3	陈全家	新疆农业大学农业生物重点技术实验室	112	621	11.0	21.0
4	高文伟	新疆农业大学农业生物重点技术实验室	68	421	12.0	18.0