RNA干扰bcl-2基因的筛选及对肝星状细胞生物活性的影响

• 作者: 刘博伟 孙桦 李光明 李定国 胡俊杰 虢灿杰
• 来源期刊: 胃肠病学和肝病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 小干扰RNA 肝星状细胞 肝纤维化
• 年，卷（期）: 2008,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 758-761
• 页数: 4页
• 分类号: R329.2
• 字数: 3694字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5709.2008.09.023

摘要

目的 研究小干扰RNA(shRNA)重组载体介导抑制大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)bcl-2基因的表达,初步观察其对HSC生物活性的影响.方法 设计有小发夹结构的3条DNA序列构建重组质粒载体pGPU6-GFP,脂质体转染HSC-T6细胞株以荧光定量PCR和Western blot筛选鉴定,通过CCK-8法及AnnexinV/PI双标记流式细胞术检测、观察其对HSC生长的影响.结果 pGPU6-GFP-shRNA1、shRNA2均能抑制bcl-2 mRNA和蛋白表达(P＜0.05),pGPU6-GFP-shRNA1转染HSC-T6株72 h后对bcl-2基因抑制达80%,且HSC-T6体外生长明显受到抑制,早期凋亡率为33.34%～44.12%.结论 bcl-2小发夹RNA重组载体shRNA1能最有效抑制HSC-T6中bcl-2的表达与细胞生长,促进凋亡,为下一步探索肝纤维化基因治疗提供实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李定国	上海交通大学医学院附属新华医院消化内科	118	745	15.0	21.0
2	虢灿杰	上海交通大学医学院附属新华医院消化内科	16	52	4.0	6.0
3	孙桦	上海交通大学医学院附属新华医院消化内科	12	61	5.0	7.0
4	李光明	上海交通大学医学院附属新华医院消化内科	29	121	6.0	9.0
5	胡俊杰	上海交通大学医学院附属新华医院消化内科	11	68	4.0	8.0
6	刘博伟	上海交通大学医学院附属新华医院消化内科	6	28	4.0	5.0