大鼠血管平滑肌细胞体外培养的表型转换及其鉴定

• 作者: SU Juan XIE Jing 徐一洲 王树人 王生兰
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 病理学与病理生理学 血管平滑肌细胞 表型转换 体外培养 α肌动蛋白 骨桥蛋白
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 268-272
• 页数: 5页
• 分类号: R363
• 字数: 5007字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-3949.2008.04.005

摘要

目的 探讨体外传代培养对血管平滑肌细胞表型转换的影响,确认体外培养的血管平滑肌细胞不同表型的最佳指标.方法 选择以未经培养传代的血管平滑肌细胞和体外培养的第4代血管平滑肌细胞作对比研究,采用免疫组织化学法检测血管平滑肌细胞α肌动蛋白,逆转录聚合酶链反应检测血管平滑肌细胞肌动蛋白22α、基质γ-羧基谷氨酸蛋白和骨桥蛋白各目的基因mRNA相对表达水平,透射电镜观察血管平滑肌细胞的形态学特征,确定其表型转换特征及各表型指标的区分效能.结果 电镜观察显示,未经培养传代的血管平滑肌细胞胞质中肌丝分布丰富、均匀,并可见到收缩表型血管平滑肌细胞的典型结构-密斑,内质网、高尔基复合体等细胞器相对较少;而体外培养至第4代时血管平滑肌细胞胞质中肌丝明显减少,内质网、高尔基复合体明显增多.原代血管平滑肌细胞α肌动蛋白免疫组织化学染色强且广泛,而体外培养至第4代时α肌动蛋白染色明显变浅、稀疏.第4代血管平滑肌细胞的骨桥蛋白mRNA表达量较原代血管平滑肌细胞显著增高(P<0.01),肌动蛋白22α mRNA在血管平滑肌细胞中的表达量较原始血管平滑肌细胞降低,但差异不大,基质γ-羧基谷氨酸蛋白mRNA表达量较未经培养传代的血管平滑肌细胞升高(P<0.05).结论 血管平滑肌细胞体外培养至第4代,即可从典型的收缩表型转化为合成表型,提示血管平滑肌细胞是一种很容易去分化的细胞.电镜形态观察α肌动蛋白和骨桥蛋白在两型血管平滑肌细胞中的差异,可作为血管平滑肌细胞表型区分的有效标志.而肌动蛋白22α和基质γ-羧基谷氨酸蛋白的表达在两型血管平滑肌细胞中虽有一定的差异,但重叠较大.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王生兰	四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室	44	194	8.0	11.0
3	徐一洲	四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室	6	39	3.0	6.0
6	SU Juan	四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室	1	29	1.0	1.0
7	XIE Jing	四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室	1	29	1.0	1.0