实时荧光定量PCR方法检测急性髓系白血病FLT3基因mRNA的表达

• 作者: 唐家宏 宋小燕 徐兵 胡斌
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: 白血病,髓细胞,急性 基因,FLT3 PCR,实时定量
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 377-379
• 页数: 3页
• 分类号: R73
• 字数: 2771字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2008.03.012

摘要

目的 构建检测急性髓细胞白血病FLT3基因mRNA表达的标准品重组质粒和荧光定量PCR方法,为进一步研究FLT3基因表达与急性髓细胞白血病的关系奠定基础.方法 利用引物设计软件设计出扩增FLT-3基因的引物和特异性荧光探针,提取K562细胞株总RNA,经RT-PCR扩增,产物纯化后与pUCm-T Vector连接,转化到大肠杆菌DH5α,筛选得到标准品的质粒FLT3P.建立荧光定量PCR检测FLT3基因技术方法,建立标准曲线并检测15例初治AML患者.结果 重组质粒进行荧光定量PCR扩增出现强烈的荧光值增长,表明FLT3 cDNA已成功克隆.以106～102copies/μl不同稀释水平的标准品进行荧光定量PCR扩增,所获得的Ct值与标准品浓度的对数存在良好线性关系,标准曲线回归系数为0.9998.AML病例FLT3表达水平显著高于正常对照组(P=0.017),且不同病例的表达水平存在较大差异.结论 成功构建用于定量检测FLT3 mRNA表达的荧光定量PCR标准品和技术方法;AML病例FLT3表达水平显著增高. ,建立标准曲线并检测15例初治AML患者.结果 重组质粒进行荧光定量PCR扩增出现强烈的荧光值增长 表明FLT3 cDNA已成功克隆.以106～102copies/μl不同稀释水平的标准品进行荧光定量PCR扩增,所获得的Ct值与标准品浓度的对数存在良好线性关系,标准曲线回归系数为0.9998.AML病例FLT3表达水平显著高于正常对照组(P=0.017),且不同病例的表达水平存在较大差异.结论 成功构建用于定量检测FLT3 mRNA表达的荧光定量PCR标准品和技术方法;AML病例FLT3表达水平显著增高. ,建立标准曲线并检测15例初治AML患者.结果 重组质粒进行荧光定量PCR扩增出现强烈的

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐兵	南方医科大学南方医院血液科	62	219	8.0	10.0
2	胡斌	中山大学达安基因诊断中心	95	868	16.0	25.0
3	宋小燕	南方医科大学南方医院血液科	22	59	5.0	6.0
4	唐家宏		5	17	2.0	4.0