人穿孔素N端肽段的放射诱导表达研究

• 作者: 张蕾 朱锡旭 李芳秋 韩艳玲
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 穿孔素 Egr-1启动子 放射诱导 杀伤活性 SPC-A1细胞
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 403-406,408
• 页数: 5页
• 分类号: R733|Q789
• 字数: 5331字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建人穿孔素N端(hPFN-N)的真核放射诱导表达载体,并在放射诱导条件的刺激下研究hPFN-N的表达产物(rhPFN-N)在肺癌细胞SPC-A1中的分布及其对该细胞的细胞毒性作用.方法:以克隆有hPFN全长cDNA序列的载体pcDNA3.1(+)/hPFN为模板,用PCR扩增hPFN-N,将该基因片段克隆到含放射诱导启动子的真核表达载体pcDNA3.1(+)/ Egr-1中,以重组体稳定转染SPC-A1细胞,经过X射线的放射诱导后,应用RT-PCR、细胞免疫化学法检测hPFN-N蛋白的表达,用MTT法测定该蛋白对靶细胞的杀伤活性.结果:成功构建了真核放射诱导表达载体pcDNA3.1(+)/ Egr-hPFN-N.以重组体转染SPC-A1细胞后,用RT-PCR检测到hPFN-N mRNA的表达.细胞免疫化学法检测结果呈阳性反应,MTT法检测结果为rhPFN-N对靶细胞的杀伤活力为 29.2%.结论:构建了pcDNA3.1(+)/ Egr-hPFN-N真核放射诱导表达载体,在经过X射线的放射诱导后,hPFN-N能够在SPC-A1细胞的细胞膜上大量表达,表达产物rhPFN-N对靶细胞有明显杀伤活力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱锡旭	南京军区南京总医院放射治疗科	67	403	11.0	15.0
2	李芳秋	南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所	93	590	11.0	20.0
3	张蕾	南京师范大学生命科学学院	6	0	0.0	0.0
4	韩艳玲	南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所	5	12	2.0	3.0