酶消化法急性分离大鼠主动脉平滑肌细胞及其鉴定

• 作者: 来利红 王如兴 蒋文平
• 来源期刊: 苏州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 大鼠 平滑肌细胞 酶消化法 免疫组化 α-肌动蛋白
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 23-25,43,插1
• 页数: 5页
• 分类号: R543|Q343.6
• 字数: 3450字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-0399.2008.01.008

摘要

目的 探讨采用酶消化法快速分离SD大鼠胸、腹主动脉平滑肌细胞的方法,为膜片钳实验提供大量原代平滑肌细胞.方法 取SD大鼠胸、腹主动脉,用酶液Ⅰ(木瓜蛋白酶等)、酶液Ⅱ(胶原酶和透明质酸酶等)酶解分离平滑肌细胞,酶液Ⅰ、Ⅱ的消化时间分别选取10、15、20、25、30 min,并两两组合以确定最佳消化时间.分离的细胞经台盼蓝染色测定其活性并通过平滑肌特异性α-肌动蛋白(α-actin)免疫组化染色鉴定.结果 分离的平滑肌细胞在倒置显微镜下计数,酶液Ⅰ、Ⅱ的消化时间分别在30、15 min时平滑肌细胞数量最多为(18.3+1.5)个/低倍视野,与其他各时间点组合相比,差异有统计学意义(P＜0.05).镜下观察典型的平滑肌细胞呈长梭形,细胞膜完整,边缘光滑;台盼蓝染色,90%以上的细胞为活细胞;免疫组化染色鉴定为平滑肌细胞.结论 酶消化法分离获取SD大鼠平滑肌细胞方法简单、成本低,采用本法可获得较大量的平滑肌细胞供实验使用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋文平	苏州大学附属第一医院心血管病研究室	228	1501	16.0	31.0
2	王如兴	苏州大学附属第一医院心血管病研究室	22	128	6.0	10.0
6	来利红	苏州大学附属第一医院心血管病研究室	10	30	3.0	5.0