PCR-SSCP快速检测结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因的研究

• 作者: 杨水云 王瑞
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 聚合酶链反应-单链构象多态性 ropB基因 药物耐受性 结核分枝杆菌
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 18-20
• 页数: 3页
• 分类号: Q781|R378.911
• 字数: 2328字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2008.05.005

摘要

目的 探讨PCR-SSCP技术检测结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因作为新的分子药敏试验方法的价值.方法 应用PCR-SSCP技术检测结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因核心区的突变,同时对片段长度为215bp的PCR扩增产物进行测序分析.受试菌为23株利福平敏感结核分枝杆菌以及35株利福平抗性结核分枝杆菌.结果 23株利福平敏感结核分枝杆菌分别用PCR-SSCP和PCR扩增片段测序均没有检测到rpoB碱基突变.而在35株利福平抗性菌株中,PCR-SSCP检测到31株与H37Rv标准株不同的带谱,PCR-SSCP检测基因突变的敏感度和特异度分别为88.6%(31/35)和100%(23/23).对35株利福平抗性菌株PCR扩增产物进行测序分析,在其中32株中检出了基因突变.测序分析检测基因突变的敏感度和特异度分别为91.4%(32/35)和100%(23/23).卡方检验,PCR-SSCP和PCR扩增片段测序两种方法的敏感度之间没有显著性差异(P＞0.05).若以DNA测序为标准,则PCR-SSCP检测基因突变的准确度、敏感度和特异度分别为93.1%(54/58),96.9%(31/32)和100%(23/23).结论 PCR-SSCP检测结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因突变可用于利福平药物敏感度的快速测定.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨水云	西安交通大学生命学院	20	253	7.0	15.0
2	王瑞	陕西省结核病防治研究所检验科	8	19	3.0	4.0