BrdU掺入与T细胞的活化和细胞因子表达的关系

• 作者: 吴长有 孟锐 李丽 杨滨燕 池沛冬
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: BrdU 增殖 流式细胞仪 细胞活化
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 72-75
• 页数: 4页
• 分类号: R392
• 字数: 3547字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2008.01.024

摘要

目的:探讨利用流式细胞术(FCM)检测细胞增殖(BrdU掺入)与T细胞的活化及细胞因子表达的关系.方法:正常人PBMC经PMA+Ionomycin刺激不同时间,在培养结束前1 h加入BrdU,利用抗BrdU以及多种抗细胞表面和抗细胞因子抗体标记,FCM检测.结果:体外刺激PBMC 48 h后,可见T细胞有BrdU掺入,但随着时间的延长,掺入率没有明显增加.对比分析BrdU掺入与活化分子表达的关系表明,CD69在刺激后8 h达高峰,而CD25则需要24 h后达到高峰.另外,BrdU掺入与细胞因子表达没有明显关系,当PBMC刺激后8 h,即有大量IFN-γ的表达,而当培养时间延长到24、48和72 h后,IFN-γ的表达没有明显改变.OKT3+antiCD28刺激T细胞后BrdU的阳性率高于PMA+Ionomycin刺激的T细胞,CD8+T细胞掺入率高于CD4+T细胞.结论:利用FCM检测BrdU+细胞可以用于评价T细胞的增殖反应,但在多克隆刺激的条件下,只有少数细胞发生增殖,并且BrdU掺入率受刺激剂种类和时间的影响,BrdU掺入与活化分子和细胞因子的表达均没有明显关系.