抗转铁蛋白受体双价抗体的构建、表达及鉴定

• 作者: 朱慧芬 沈关心 沈昕 王国斌 肖代雯 邢薇 雷萍 黄宇 黄韬
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 转铁蛋白受体 单链抗体 双价抗体
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 59-61
• 页数: 3页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2191字
• 语种: 中文

摘要

目的:抗转铁蛋白受体(TfR)双价抗体(bsFv)构建、表达及其与细胞结合的活性鉴定.方法:以抗TfR的单链抗体(scFv)为模板,设计引物引入中间连接肽(G4s)及酶切位点AscI,通过PCR方法扩增两条scFv片段,将其连接并克隆至原核表达载体pAB1,转化大肠杆菌TG1,阳性菌经IPTG诱导表达,FCM检测bsFv与K562,HepG2肿瘤细胞结合的活性及特异性.结果:酶切鉴定及DNA测序证明该bsFv构建成功;SDS-PAGE、Western blot鉴定表明表达蛋白分子量与bsFv理论值一致;FCM结果证明bsFv可与K562,HepG2肿瘤细胞特异性结合,且结合的阳性率较scFv有所提高.结论:成功构建了抗转TfR的bsFv,且能与K562,HepG2肿瘤细胞特异性结合.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈关心	华中科技大学同济医学院	114	554	12.0	18.0
2	黄韬	华中科技大学同济医学院	125	1005	16.0	26.0
3	王国斌	华中科技大学同济医学院	257	1847	21.0	29.0
4	朱慧芬	华中科技大学同济医学院	45	154	8.0	9.0
5	肖代雯	四川省人民医院检验科	5	7	2.0	2.0
6	雷萍	华中科技大学同济医学院	14	14	2.0	3.0
7	黄宇	华中科技大学同济医学院	5	22	2.0	4.0
8	邢薇	华中科技大学同济医学院	2	6	2.0	2.0
9	沈昕	华中科技大学同济医学院	1	2	1.0	1.0