RNA干扰对急性髓系白血病AML1-ETO融合基因表达的抑制作用

• 作者: 卫菊 李肃 王椿 秦尤文 蔡琦 谢匡成 颜式可 马晓霞 高彦荣
• 来源期刊: 中华血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 融合蛋白,AML1-ETO Kasumi-1细胞 细胞周期
• 年，卷（期）: 2008,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 607-610
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 3512字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-2727.2008.09.008

摘要

目的 应用RNA干扰技术抑制Kasumi-1细胞AML1-ETO融合基因的表达,研究随后出现的细胞增殖和细胞周期变化.方法 体外化学合成针对AML1-ETO融合基因的小干扰RNA(siRNA),并用电穿孔方法将AML1-ETO siRNA转染Kasumi-1细胞,以非特异性的siRNA转染细胞作阴性对照;电转带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的载体,流式细胞术检测其绿色荧光以确定电转效率;荧光染料实时定量PCR及Western blot检测AML1-ETO siRNA的抑制效应;并应用CCK-8实验法检测细胞增殖率;采用碘化丙锭(PI)法测定细胞周期DNA含量.结果 电转增强EGFP的转染效率可达44.5%;电转AML1-ETO siRNA可以有效抑制AML1-ETO融合基因在mRNA和蛋白水平的表达;电转AML1-ETO siRNA 72 h后细胞增殖率[(47.90±0.02)%]低于对照组[(66.90±0.08)%](P<0.05);PI染色显示AML1-ETO siRNA转染细胞72 h后,G1期细胞比例为38.3%,对照组为31.6%,而处于G2/M期细胞分别为1.8%和2.4%.结论 化学合成的特异性siRNA能抑制AML1-ETO融合基因的表达,siRNA介导的AML1-ETo融合蛋白表达减少阻滞Kasnmi-1细胞在G1期,进而抑制细胞增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高彦荣	上海市第一人民医院血液科	34	124	7.0	9.0
2	王椿	上海市第一人民医院血液科	66	239	10.0	13.0
3	马晓霞	上海市第一人民医院血液科	4	29	3.0	4.0
4	秦尤文	上海市第一人民医院血液科	14	107	6.0	10.0
5	颜式可	上海市第一人民医院血液科	26	156	7.0	11.0
6	蔡琦	上海市第一人民医院血液科	23	89	6.0	8.0
7	谢匡成	上海市第一人民医院血液科	21	201	7.0	14.0
8	李肃	上海市第一人民医院血液科	4	2	1.0	1.0
9	卫菊	上海市第一人民医院血液科	6	21	3.0	4.0