T7 RNA聚合酶催化的荧光扩增技术检测结直肠癌细胞方法的建立及其意义

• 作者: 于波 安萍 朱自满 李世拥
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 反转录聚合酶链反应 T7 RNA聚合酶 结直肠肿瘤
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 结直肠癌蛋白标志物研究专题
• 页码范围: 493-494
• 页数: 2页
• 分类号: R735.3
• 字数: 1893字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2008.05.004

摘要

目的 探讨T7 RNA聚合酶催化的荧光扩增技术检测循环血中结直肠癌细胞的可行性及其价值.方法 配制不同浓度的HT29细胞悬液并加入1×107个健康人外周血单核细胞,建立模拟结直肠癌循环肿瘤细胞的模型,从中分离出有核细胞后,加入生物素化抗CEA单克隆抗体(针对Gold抗原决定簇Ⅳ),孵育后加入亲和素-生物素-DNA分子,再加入T7 RNA聚合酶进行转录扩增反应,对生成的RNA产物进行荧光检测,并用RT-PCR检测从模型中分离出的有核细胞中CEA mRNA的表达情况.结果 建立了检测结直肠癌细胞的T7 RNA聚合酶催化荧光扩增技术,最低可从1×107个单核细胞中检出5个癌细胞,比RT-PCR最低可从1×107个单核细胞中检出1×102个癌细胞更加敏感.结论 T7 RNA聚合酶催化荧光扩增技术可用于检测外周血中的循环肿瘤细胞,是一种敏感的检测结直肠癌细胞的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李世拥	北京军区总医院全军普通外科中心	204	1337	18.0	25.0
2	于波	北京军区总医院全军普通外科中心	148	785	15.0	19.0
3	安萍	北京军区总医院中心实验室	79	403	11.0	13.0
4	朱自满	北京军区总医院全军普通外科中心	7	10	3.0	3.0