贝氏柯克斯体感染小鼠血清与其毒力相关蛋白的免疫印迹反应

• 作者: 孙长俭 昊德平 杨晓 温博海 王锡乐 陈梅玲
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 贝氏柯克斯体 毒力 重组蛋白 免疫印迹
• 年，卷（期）: 2008,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 593-596
• 页数: 4页
• 分类号: R376
• 字数: 3878字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2008.07.001

摘要

目的 筛选与贝氏柯克斯体感染血清反应的贝氏柯克斯体毒力相关蛋白.方法 以贝氏柯克斯体标准株九里株为模板.采用PCR扩增包括IV型分泌系统、分泌性蛋白和膜蛋白在内的毒力及毒力相关的基因.将扩得目的基因片段与原核表达质粒pET32a重组.将重组质粒转化大肠杆菌.用贝氏柯克斯体实验感染小鼠血清与转化大肠杆菌作免疫印迹.结果 设计173对引物共扩增出170个目的基因.经PCR及酶切鉴定,有155个基因与pET32a质粒重组成功.SDS-PAGE电泳分析发现.共有104个转化菌表达甘的蛋白.在104个重组蛋白中,筛选到32个与贝氏柯克斯体感染小鼠血清反应的重组蛋白.结论 这些与贝氏柯克斯体感染血清反应的毒力相关蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性.