检测贝氏柯克斯体的实时荧光定量PCR

• 作者: 张晶波 李丽莉 温博海 牛东升 邱玲 陈梅玲
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 贝氏柯克斯体 实时定量PCR 23S rRNA 感染
• 年，卷（期）: 2005,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 652-655
• 页数: 4页
• 分类号: R376
• 字数: 2881字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2005.08.003

摘要

目的采用新型TaqMan-MGB探针建立检测贝氏柯克斯体的实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)方法.方法根据贝氏柯克斯体特异的23S rRNA插入基因序列设计引物和探针,以克隆的23S rRNA插入基因片段作DNA模板,在荧光定量PCR检测仪(ABI 7900型)上建立实时荧光定量检测方法.结果建立的定量标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系(r=0.997);与套式PCR相比较,荧光定量PCR检测敏感性是其100倍.用荧光定量PCR检测其它相关立克次体,检出结果均为0.用荧光定量PCR检测贝氏柯克斯体感染的小鼠脾脏标本,脾脏中贝氏柯克斯体的感染量与感染过程具有相关性.结论本研究建立的检测贝氏柯克斯体的实时荧光定量PCR具有很高的特异性和敏感性,特别适合样本中微量贝氏柯克斯体DNA的检测,其定量检测可用于动物实验中的贝氏柯克斯体感染程度的分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	牛东升	军事医学科学院微生物流行病研究所	32	54	3.0	5.0
2	温博海	军事医学科学院微生物流行病研究所	58	174	8.0	11.0
3	邱玲	军事医学科学院微生物流行病研究所	26	36	3.0	5.0
4	陈梅玲	军事医学科学院微生物流行病研究所	55	160	6.0	10.0
5	张晶波	军事医学科学院微生物流行病研究所	3	13	1.0	3.0
6	李丽莉	军事医学科学院微生物流行病研究所	3	26	2.0	3.0