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摘要:
目的 构建人结肠癌细胞株HT29的RNA干扰(RNAi)表达载体以抑制黏着斑激酶(FAK),检测FAK沉默后细胞对5-氟尿嘧啶(5-FU)敏感性的变化.方法 利用针对FAK基因的特异性寡核苷酸序列及对照序列构建重组体,酶切并测序鉴定,用脂质体2000转染细胞,G418筛选.采用RT-PCR和免疫组化检测干扰前后细胞内FAK的表达变化,MTT法检测细胞对5-FU敏感性的变化.结果 酶切鉴定和测序证实插入序列完全正确.靶向FAK干扰后,免疫组化显示FAK蛋白表达显著降低,RT-PCR显示FAK mRNA的表达下调了76.94%,MTT显示HT29细胞对5-FU敏感性较其他组显著提高,IC50值明显下降(P<0.05).结论 成功构建靶向FAK的RNAi载体并有效抑制了FAK的表达,后者显著提高了HT29细胞对5-FU的敏感性,为寻求新的基因治疗方法提供了可能.
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文献信息
篇名 HT29细胞黏着斑激酶表达与其对5-氟尿嘧啶敏感性的关系研究
来源期刊 解放军医学杂志 学科 医学
关键词 黏着斑激酶 RNA干扰 结肠肿瘤 基因表达
年,卷(期) 2008,(4) 所属期刊栏目 实验研究
研究方向 页码范围 421-424
页数 4页 分类号 R34-33|R735.35
字数 3364字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:0577-7402.2008.04.019
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 梁后杰 第三军医大学西南医院肿瘤科 197 911 14.0 18.0
2 潘凤 第三军医大学西南医院肿瘤科 45 209 8.0 12.0
3 杨黎 第三军医大学西南医院肿瘤科 15 45 3.0 6.0
4 陈玉英 第三军医大学西南医院肿瘤科 9 28 3.0 5.0
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研究主题发展历程
节点文献
黏着斑激酶
RNA干扰
结肠肿瘤
基因表达
研究起点
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相关学者/机构
期刊影响力
解放军医学杂志
月刊
0577-7402
11-1056/R
大16开
北京100036信箱188分箱
2-74
1964
chi
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