短发夹RNA干扰黏着斑激酶对结肠癌多细胞球氟尿嘧啶敏感性的影响

• 作者: 向浏欣 杨黎 梁后杰 潘凤 蒋金妍 陈克力 陈玉英
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 球形体,细胞 黏着斑激酶 RNA干扰 结肠肿瘤 基因表达 药物筛选试验,抗肿瘤
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 286-289
• 页数: 4页
• 分类号: R34-33|R735.35
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2009.03.015

摘要

目的 探讨抑制黏着斑激酶(FAK)在结肠癌HT29细胞中的表达能否提高HT29多细胞球对氟尿嘧啶(5-FU)的敏感性.方法 构建带有短发夹RNA(shRNA)靶向干扰FAK的重组体pGenesil-1-FAK,抑制FAK在HT29中的表达,采用实时定量PCR和Western blotting检测其在单层细胞和多细胞球中的干扰效率.采用血球计数板计数法检测多细胞球在各时间点的增殖速度,流式细胞术检测干扰对5-FU诱导的多细胞球凋亡的影响,CCK-8法检测单层细胞和多细胞球对5-FU的敏感性的变化.结果 用重组体pGenesil-1-FAK靶向干扰FAK能显著抑制单层细胞FAK mRNA,并能抑制单层细胞和多细胞球FAK蛋白的表达.多细胞球的增殖速度并不受FAK shRNA干扰的影响,各组间在各时间点均无显著性差异(P>0.05).流式细胞术结果显示,FAK shR-NA干扰能够使多细胞球的自发凋亡率(16.48%±1.18%)和5-FU诱导的凋亡率(21.50%±2.62%)显著增加(P=0.000、P=0.001),且两者之间差异显著(P=0.003).CCK-8法检测结果显示,FAK shRNA干扰提高了单层细胞和多细胞球对5-FU的敏感性,且两者无显著差异(P>0.05),从而逆转了因三维球体结构产生的多细胞耐药性.结论 FAK靶向RNA干扰虽不影响多细胞球的增殖,但能促进多细胞球凋亡,并增加多细胞球对5-FU的敏感性;FAK可能介导了结肠癌的多细胞耐药.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋金妍	第三军医大学西南医院肿瘤科	12	24	3.0	4.0
2	梁后杰	第三军医大学西南医院肿瘤科	197	911	14.0	18.0
3	潘凤	第三军医大学西南医院肿瘤科	45	209	8.0	12.0
4	陈克力	第三军医大学西南医院肿瘤科	19	66	5.0	7.0
5	向浏欣	重庆邮电大学生物信息学院	20	45	3.0	5.0
6	杨黎	第三军医大学西南医院肿瘤科	15	45	3.0	6.0