生物素化高分子涂层的制备与评价

• 作者: 卢天成 孙静 景遐斌 章培标 邓超 陈学思
• 来源期刊: 高等学校化学学报
• 学科: 化学
• 关键词: 生物活性涂层 生物素 链亲和素 蛋白质吸附 蛋白质固载 免疫分析
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 837-841
• 页数: 5页
• 分类号: O633.14
• 字数: 3010字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0251-0790.2008.04.036

摘要

制备了一种能固载目标蛋白质,却没有非特异性蛋白质吸附的高分子涂层.该涂层是可生物降解的油水两亲性的三嵌段聚合物,即生物素偶联的聚乙二醇-聚丙交酯-聚赖氨酸共聚物.将高分子溶解于N,N-二甲基甲酰胺中,并涂布在预先包被了聚赖氨酸的脱脂玻片基质上,形成高分子涂层,在其表面包被一层由明胶和聚N-乙烯基吡咯烷酮组成的封闭剂.使用酶标免疫分析法,对高分子涂层表面的生物活性进行评价.依次将辣根过氧化物酶标记的链亲和素和生物素偶联的小鼠球蛋白抗原和碱性磷酸酯酶标记的马抗小鼠抗体固载在高分子涂层表面上,通过标记酶与底物作用生色.分析结果表明,经过封闭以后,生物素化的高分子涂层表面能够排斥非特异性的蛋白质;同时特异性蛋白质之间(如生物素和链亲和素之间、抗原和抗体之间)的相互作用依然保留,并且固定在表面的蛋白质依然保留其生物活性.因此生物素化的聚乙二醇-聚丙交酯-聚赖氨酸三嵌段高分子可以作为生物活性材料,用于蛋白质固载和蛋白质分离及分析.