小鼠支气管肺泡干细胞的培养鉴定和分选

• 作者: 孙建国 安江洪 敖绪军 钱莘 陈正堂
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 Clara细胞抗原 肺泡表面活性蛋白C 流式细胞术
• 年，卷（期）: 2008,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 775-778
• 页数: 4页
• 分类号: R322.3|R329.2|R329.24
• 字数: 4948字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2008.09.001

摘要

目的 对正常成年小鼠肺内支气管肺泡干细胞(bronchoalveolar stem cell,BASC)进行克隆培养、鉴定和流式细胞仪分选.方法 用胶原酶和分散酶联合消化小鼠肺组织制备肺单细胞悬液,并经免疫磁珠分选Sca-1+细胞;胶原蛋白和小鼠Swiss-3T3成纤维细胞系包被培养板;无血清乳腺上皮细胞培养基培养Sca-1+细胞;双重免疫荧光染色Clara细胞抗原(CCA)和肺泡表面活性蛋白c(sP.c)鉴定BASC,并用流式细胞仪分选BASC.结果 通过胶原酶和分散酶联合消化小鼠肺组织,平均每只成年小鼠可得到有核细胞总数(1.6-1.8)×107;经磁珠分选后的Sca-1+细胞纯度明显高于未经分选的肺Sca+1+细胞[分别为(87.3±5.9)%、(9.6±1.8)%,P<0.05];在无血清乳腺上皮细胞培养基中Sca-1+细胞在第4天可形成BASC克隆和其他不表达CCA、SP.c的细胞克隆;流式细胞仪检测CD45-CD31-Sca-1+CD34+细胞占肺细胞总数的0.7%～1.1%,根据此分子标记能够分选出高纯度的BASC.结论 通过胶原酶和分散酶联合消化,免疫磁珠分选的Sca-1+细胞在无血清乳腺上皮细胞培养基中能够形成非纯化的BASC克隆,而流式细胞仪可以分选出高纯度的BASC.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙建国	第三军医大学新桥医院全军肿瘤诊治研究所	67	567	12.0	20.0
2	陈正堂	第三军医大学新桥医院全军肿瘤诊治研究所	267	2232	19.0	35.0
3	敖绪军	第三军医大学新桥医院全军肿瘤诊治研究所	17	114	7.0	9.0
4	钱莘	第三军医大学新桥医院全军肿瘤诊治研究所	7	47	4.0	6.0
5	安江洪	第三军医大学新桥医院全军肿瘤诊治研究所	7	44	4.0	6.0