目的 探讨检测乙型肝炎(下称乙肝)病毒表面抗体(抗-HBs)两种方法在不同温育时间的结果差异. 方法采用免疫酶法(EIA)一步法、时间分辨荧光(TRF)法检测抗-HBs,OD值在0.056~0.380之间标本温育时间变化而造成的结果值的差异.结果 用30 min EIA一步法检测抗-HBs,结果37例弱阳性和59例阴性,再用60 min EIA一步法抗-HBs检测,结果41例呈弱阳性和55例阴性.用TRF两步法抗-HBs测定出42例弱阳性和54例阴性,发现有6例标本不同于温育30 min的EIA一步法抗-HBs检测的结果.结论 酶联免疫吸附试验作为一种固相免疫测定,抗原抗体的结合反应在固相上进行,要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合,必须在一定的温度、时间条件下反应.温育所需时间与温度成反比,尤其在冬天,标本从室温到恒温箱这一过程很容易造成实际测定温育时间不够,也是造成灰区误差的原因之一.