AdCMV-BMP-7促进兔骨髓基质细胞的成骨分化

• 作者: 何海龙 叶晓健 张桦 施伟伟 许国华 顾韬
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 骨形态发生蛋白质类 腺病毒 骨髓细胞 细胞分化 组织构建
• 年，卷（期）: 2008,（25）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 4860-4864
• 页数: 5页
• 分类号: R329.2
• 字数: 5565字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.25.015

摘要

目的:研究表明骨形态发生蛋白7可促进软骨的再生和重建.实验拟证实人骨形态发生蛋白7可促进兔骨髓基质细胞分化为成骨细胞.方法:实验于2005-10/2006--03在解放军第二军医大学长征医院完成.①实验材料:pAdTrack-CMV,pAdEasy-1 及pGEM-T-BMP-7质粒均由许国华博士惠赠;大肠杆菌TG1、DH5a、BJ5183及包装细胞株293为本实验室保存:成年雄性新西兰大白兔2只购于解放军第二军医大学动物中心.②实验过程及评估:构建重组腺病毒表达载体AdCMV-BMP-7:首先将骨形态发生蛋白7序列插入到穿梭载体pAdTrack中,得到重组腺病毒pAdCMV-BMP-7;传代培养至第3代兔骨髓基质细胞,加入不同滴度值的AdCMV-BMP-7培养7 d,以感染腺病毒空载体和未感染AdCMV-BMP-7的兔骨髓基质细胞作为阴性对照,观察碱性磷酸酶含量与时间及剂量的关系.结果:①重组AdCMV-BMP-7的构建:采用的AdEasyTM-1载体系统含有报告基因绿色荧光蛋白,筛选时间大为缩短,得到大约34 kb大小的AdCMV-BMP-7.②AdCMV-BMP-7促进兔骨髓基质细胞分化结果:感染AdCMV-BMP-7后的骨髓基质细胞合成碱性磷酸酶明显增加且旱时间及剂量依赖性,而骨髓基质细胞感染腺病毒空载体对碱性磷酸酶合成无影响,提示骨髓基质细胞在单一的骨形态发生蛋白7作用下即可分化为成骨细胞.结论:实验结果提示重组腺病毒表达载体AdCMV-BMP-7能够促进骨髓基质细胞向成骨细胞方向分化,且成时间依赖性及剂量依赖性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许国华	解放军第二军医大学长征医院科	8	21	4.0	4.0
2	叶晓健	解放军第二军医大学长征医院科	17	64	5.0	7.0
3	何海龙	解放军第二军医大学长征医院科	3	6	1.0	2.0
4	施伟伟	解放军第二军医大学长征医院科	1	1	1.0	1.0
8	顾韬	解放军第二军医大学长征医院科	1	1	1.0	1.0
9	张桦	解放军第二军医大学长征医院科	1	1	1.0	1.0