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摘要:
背景:聚合酶链式反应-直接测序分型技术被誉为HLA分型的金标准.在临床移植配型和骨髓库供者的大规模HLA分型中逐渐被广泛采用,但该方法的最大缺点是存在较高比例的模棱两可分型结果,故亟待寻找并建立适合中华骨髓库大规模供者HLA-测序模棱两可分型结果的解决方案.目的:调查中国南方汉族人群HLA-A,B,DRB1基因测序分犁中模棱两可结果的分布状况,评估其可能的解决方案.设计、时间及地点:观察测量实验,2007-08/2008-08在深圳市血液中心输血医学研究所免疫遗传重点实验室完成.对象:选择深圳骨髓库的汉族骨髓供者416名,供者民族和籍贯按照自述原则确定.方法:采用聚合酶链反应-直接测序分型方法对416名汉族供者的HLA-A,B,DRB1基因进行测序分型,分析3个基因座模棱两可分型结果的分布情况,并分别采用高分辨聚合酶链反应-序列特异性引物法和杂合性模棱两可引物分离法进行解决:采用直接计数法统计基因频率,计算真实等位基因的相对概率.主要观察指标:416名供者HLA-A,B,DRB1基因直接测序分型结果的分布.HLA-A,B,DRB1基因测序模棱两可分型结果的分类及分布.序列特异性引物法及杂合性模棱两可引物分离法对模棱两可分型结果的解决能力.结果:80.29%的标本其HLA-A,B,DRB1基因出现模棱两可结果.80%左右的HLA-A,B基因和不足40%的HLA-DRB1,基因模棱两可分型结果可以采用杂合性模棱两可引物分离法解决.其他则需要高分辨聚合酶链反应-序列特异性引物法解决.根据等位基凼频率计算553个模棱两可等位基因组合中,75%的真实等位基凶组合的相对概率大于98%.结论:杂合性模棱两可引物分离法和高分辨聚合酶链反应-序列特异性引物法分别对位于HLA-A,B和HLA-DRB1基因检测区内、外的模棱两可分型结果具有较高的解决能力,二者互为补充:在大规模供者HLA分型中应用频率数据解决模棱两可结果有一定的应用价值.
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文献信息
篇名 中国南方汉族人群HLA-A,B,DRB1基因测序分型模棱两可结果的分布及其解决方案
来源期刊 中国组织工程研究与临床康复 学科 医学
关键词 人类白细胞抗原 模棱两可 高分辨聚合酶链反应-序列特异性引物法 杂合性模棱两可引物分离法
年,卷(期) 2008,(53) 所属期刊栏目 技术与方法
研究方向 页码范围 10481-10486
页数 6页 分类号 R617
字数 7079字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.53.030
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 邹红岩 深圳市血液中心组织配型与免疫遗传研究室 49 152 6.0 9.0
2 李桢 深圳市血液中心组织配型与免疫遗传研究室 43 170 6.0 11.0
3 程良红 深圳市血液中心组织配型与免疫遗传研究室 30 142 6.0 10.0
4 金士正 深圳市血液中心组织配型与免疫遗传研究室 17 101 5.0 9.0
5 王巍 5 18 3.0 4.0
6 蒋妍 2 12 2.0 2.0
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沈阳浑南新区10002信箱
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1997
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