微小隐孢子虫重组BCG-CP15/60-23疫苗的构建及鉴定

• 作者: 傅婷霞 刘克义 崔勇 张佃波 文桂香 李瑾 江洪涛 肖婷 胡颖新 韩广东 魏庆宽 黄炳成
• 来源期刊: 中国热带医学
• 学科: 医学
• 关键词: 微小隐孢子虫 CP15/60-23基因 重组卡介苗 构建 鉴定
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 917-919,921
• 页数: 4页
• 分类号: R382.9
• 字数: 2995字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-9727.2008.06.013

摘要

目的 构建和鉴定微小隐孢子虫CP15/60-23基因重组卡介苗. 方法 以pET-30a-CP15/60-23质粒为模板,PCR扩增CP15/60-23基因片段,然后克隆至TA载体;通过酶切、测序鉴定后,将CP15/60-23基因片段用限制性内切酶切下定向克隆至大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭表达载体pMV262结核杆菌热休克蛋白(HSP)启动子下游,构建重组质粒pMV262-CP15/60-23,用电穿孔将该质粒导入野生卡介苗(BCG-WT)构建微小隐孢子虫CP15/60-23基因重组卡介苗. 结果 扩增出792bp的微小隐孢子虫CP15/60-23基因片段,成功构建pMV262-CP15/60-23质粒,并通过PCR扩增和提取质粒、酶切等表明该质粒被正确导入BCG-WT中. 结论 成功构建微小隐孢子虫CP15/60-23基因重组卡介苗,为研究隐孢子虫病新的防治方法打下了基础.