视网膜神经节细胞-5应激损伤后原蛋白转化酶-2和羧基肽酶-E介导的神经肽加工

• 作者: 刘换新 周东 唐松山 张娟辉 祁荣
• 来源期刊: 神经科学通报（英文版）
• 学科: 医学
• 关键词: 神经肽原蛋白加工系统 视网膜神经节细胞-5 体外试验 氧葡萄糖剥夺模型 原蛋白转化酶-2:羧基肽酶-E 前神经肽原-Y
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 页码范围: 7-14
• 页数: 8页
• 分类号: R741.02
• 语种: 英文
• DOI: 10.1007/s12264-009-1027-8

摘要

目的通过分析细胞和培养液中的原蛋白转化酶-2,羧基肽酶-E和前神经肽原-Y蛋白的表达水平,研究视网膜神经节细胞-5(retina ganglion cell-5 cells,RGC-5)在应激损伤后的神经肽原蛋白加工系统的变化.方法在培养液中加入终浓度为0.1 μmol/L的staurosporine并保温24 h完成RGC-5的分化;使用氧葡萄糖剥夺(oxygen and glucosedeprivation,OGD)的细胞模型,诱导分化的RGC-5的应激损伤;利用PI和TUNEL染色方法测定急性和慢性应激模型的细胞死亡率;使用Western blot和原蛋白转化酶2的活性测定方法,检测细胞和培养液中的原蛋白转化酶-2,羧基肽酶-E和前神经肽原-Y蛋白表达水平.结果应激反应引起了以剂量依赖性的细胞死亡.随OGD应激剂量的增加,原蛋白转化酶-2和前神经肽原-Y蛋白表达水平逐渐增加,而羧基肽酶原-E逐渐降低.细胞应激损伤后,原蛋白转化酶-2的活性降低.在培养液中,原蛋白转化酶-2和原蛋白转化酶原-2逐渐降低,而羧基肽酶-E,羧基肽酶原-E和前神经肽原-Y渐渐增加.结论应激损伤通过降低原蛋白转化酶-2的活性和原蛋白转化酶原-2的激活,抑制了神经肽原蛋白加工系统,而应激后原蛋白的堆积和羧基肽酶-E细胞外排的增加又反过来加重了细胞的损伤.原蛋白加工系统在应激损伤中起重要作用.