铁皮石斛多糖对缺氧/复氧视网膜神经节细胞损伤的影响

• 作者: 肖杨晶 陈婷
• 来源期刊: 中国中医眼科杂志
• 关键词: 铁皮石斛多糖 缺氧/复氧 视网膜神经节细胞 凋亡
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 613-617
• 页数: 5页
• 分类号: R774.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13444/j.cnki.zgzyykzz.2020.09.002

摘要

目的 探讨铁皮石斛多糖(PDC)对缺氧/复氧损伤视网膜神经节细胞RGC-5的保护作用,并探讨其机制.方法 培养RGC-5细胞,造成缺氧/复氧损伤模型,分为对照组、模型组、PDC低浓度组及PDC高浓度组,MTT法观察细胞活性,测各组细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)及细胞超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的变化,流式细胞技术检测RGC-5细胞内活性氧表达,Hoechst33258染色检测凋亡细胞比例,Western blot分析bcl-2及Bax抗体的变化.结果 (1)细胞存活率:模型组较对照组降低(t=19.620,P=0.000),差异有统计学意义.PDC低浓度组(t=4.518,,P=0.002)和PDC高浓度组(t=6.399,P=0.000)均高于模型组,差异具有统计学意义.(2)LDH释放量:模型组较对照组增加(t=25.576,P=0.000),差异有统计学意义.PDC低浓度组(t=13.396,P=0.000)及PDC高浓度组(t=18.446,P=0.000)均低于模型组,差异有统计学意义.(3)SOD水平:模型组较对照组降低(t=21.198,P=0.000),差异有统计学意义;PDC低浓度组(t=7.981,P=0.000)及PDC高浓度组(t=12.007,P=0.000)均高于模型组,差异具有统计学意义.(4)MDA水平:模型组较对照组升高(t=7.461,P=0.000),差异有统计学意义;PDC低浓度组(t=2.865,P=0.021)及PDC高浓度组(t=4.668,P=0.002)均低于模型组,差异具有统计学意义.(5)ROS的表达:对照组ROS主峰位于基线左侧,模型组细胞内ROS表达升高,主峰右移,PDC作用于RGC-5细胞后,细胞内ROS表达下降,ROS主峰逐渐左移.(6)RGC-5细胞凋亡:对照组未见明显凋亡细胞,细胞核均为暗蓝色低荧光;模型组细胞核着色不均匀,凋亡细胞呈亮蓝色高荧光;PDC处理后亮蓝色的凋亡细胞数量逐渐减少.(7)Bcl-2及Bax蛋白表达水平:模型组Bcl-2蛋白相对表达量较对照组降低(t=46.500,P=0.000),差异有统计学意义.PDC低浓度组(t=6.228,P=0.000)和PDC高浓度组(t=6.871,P=0.000)均高于模型组,差异具有统计学意义.模型组Bax蛋白相对表达量较对照组升高(t=7.766,P=0.000),差异有统计学意义;PDC低浓度组(t=5.587,P=0.001)和PDC高浓度组(t=13.864,P=0.000)均低于模型组,差异具有统计学意义.结论 PDC可以抑制缺氧/复氧诱导的RGC-5细胞氧化损伤及凋亡的发生,在预防和治疗视网膜缺血再灌注损伤疾病方面具有一定的应用前景.