鸡传染性喉气管炎病毒gD基因的表达及间接ELISA检测方法的初步建立

• 作者: 崔保安 张素梅 李祥瑞 杨明凡 陈红英
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡传染性喉气管炎病毒 gD基因 原核表达 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 263-265,287
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3063字
• 语种: 中文

摘要

将含有ILTV gD糖蛋白基因的重组质粒pMD-T-gD用EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切后,回收目的片段,将其连接到原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET-gD.将pET-gD转化到宿主表达菌BL21中,用IPTG诱导表达,SDS-PAGE结果显示表达目的蛋白大小为55 000,Western blotting表明表达产物具有良好的免疫原性.表达的蛋白产物经纯化后作为ELISA包被抗原,以辣根过氧化物酶标记的羊抗鸡IgG作为二抗,初步建立了间接ELISA诊断方法,并确定了抗原最佳包被浓度为24.5 mg/L;最佳血清稀释度为1:80,初步确定ELISA判定标准为D450≥0.25判为阳性,小于0.25为阴性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张素梅	河南农业大学牧医工程学院	110	653	14.0	21.0
2	陈红英	河南农业大学牧医工程学院	168	646	12.0	16.0
3	崔保安	河南农业大学牧医工程学院	274	2313	25.0	33.0
4	李祥瑞	南京农业大学动物医学院	126	1418	20.0	33.0
5	杨明凡	南京农业大学动物医学院	74	425	11.0	17.0