单抗捕捉ELISA检测猪附红细胞体血清抗体方法的建立

• 作者: 刘佩兰 单虎 吴延功 吴晓东 张守富 张浩 朱绍辉 王志亮
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪附红细胞体病 单克隆抗体 单抗捕捉ELISA 抗体检测
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 人兽共患病
• 页码范围: 55-58,91
• 页数: 5页
• 分类号: S855.99
• 字数: 4587字
• 语种: 中文

摘要

在制备针对猪附红细胞体病的特异性单克隆抗体的基础上,建立了单抗捕捉快速检测猪附红细胞体病抗体的ELISA方法,并对影响ELISA结果的各项反应条件进行了优化.结果表明,猪附红细胞体腹水单抗的最佳稀释度为1:20 000,猪附红细胞体病抗原工作质量浓度为4.088 mg/L,血清稀释度为1:40,HRP标记的兔抗猪IgG的工作浓度为1:5 000.待检血清和酶标二抗的反应时间均为37℃1 h;底物在室温显色时间为10 min.已建立的ELISA方法与PCR平行检测50份样本,总符合率为92%,表明该方法特异性强、快速、敏感性高.用该法检测了各地采集的171份血清,阳性率为40.4%,与镜检的符合率为59.2%;阴性率为47.4%,与镜检的符合率为66.7%,总符合率为67.3%.