转染血红素氧合酶—1基因减轻人肝细胞体外缺氧—复氧损伤

• 作者: 汪慧访 秦磊 胡明政 钱海鑫
• 来源期刊: 中华器官移植杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血红素氧化酶(脱环) 腺病毒科 细胞低氧 再灌注损伤 肝细胞
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 14-16
• 页数: 3页
• 分类号: R6
• 字数: 2616字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-1785.2009.01.003

摘要

目的 探讨血红素氧合酶-1重组腺病毒载体(Ad-HO-1)体外转染人肝细胞的转染效果及其对肝细胞缺氧-复氧损伤的影响.方法 取人肝细胞系L-02细胞,滴加低温保存的Ad-HO-1,分别培养24 h、48 h和72 h(24 h组、48 h组和72 h组),并以加入空载体腺病毒共培养的L-02细胞为空白对照.采用逆转录聚合酶链反应法检测各组肝细胞HO-1 mRNA的表达水平;以间接免疫荧光标记法检测各组肝细胞的HO-1表达率;在倒置荧光显微镜下观察转染24 h和72 h的肝细胞中绿色荧光蛋白(EGFP)的表达.取空白对照组肝细胞(培养48 h)和48 h组肝细胞,缺氧培养4 h后再有氧培养8 h,采用四甲基偶氮唑盐法测定两组肝细胞存活率.结果 24 h组、48 h组和72 h组HO-1 mRNA表达水平明显高于空白对照组,且随着转染时间的延长,HO-1 mRNA的表达水平逐渐升高.空白对照组HO-1的表达率为2.0%,24 h组为29%,48 h组为85.6%,72 h组为84.6%.基因转染后24 h和72 h,可以观察到L-02细胞中EGFP的表达.经历缺氧-复氧实验后,空白对照组肝细胞的存活率为(37.7±3.5)%,48 h组肝细胞的存活率为(89.4±5.2)%,二者相比较,差异有统计学意义(P<0.01).结论 Ad-HO-1在体外能有效的转染人肝细胞;与未转染者相比,转染肝细胞的缺氧-复氧损伤程度较轻.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱海鑫	苏州大学附属第一医院普外科	228	836	13.0	16.0
2	胡明政	苏州大学附属第一医院普外科	7	31	4.0	5.0
3	汪慧访	宁波市第一医院普外科	11	48	3.0	6.0
4	秦磊		1	6	1.0	1.0