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摘要:
目的 构建尿激酶型纤溶酶原激活因子(uPA)原核表达质粒,并在大肠埃希菌BL21中表达,为进一步研究uPA奠定基础.方法 应用逆转录RT-PCR,从人肝细胞cDNA中扩增人尿激酶型纤溶酶原激活因子基因序列,与原核表达质粒pET32a重组,获得表达质粒uPA-pET32a.用氨苄青霉素平板筛选转化子,双酶切与DNA测序进行鉴定,用IPTG诱导表达,并用Western blotting进行鉴定.结果 从肝细胞cDNA中扩增的uPA基因片段长1296 bp,酶切及DNA测序证实uPA-pET32a重组质粒构建正确,表达融合蛋白分子量约为68900Mr,经Western blotting证实为目的蛋白.结论 成功构建了重组原核表达质粒uPA-pET32a.并能在大肠埃希菌内表达,所表达的融合蛋白分子量大小与预期的相一致,为进一步的研究奠定了基础.
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文献信息
篇名 尿激酶型纤溶酶原激活因子cDNA的克隆与原核表达
来源期刊 热带医学杂志 学科 医学
关键词 尿激酶型纤溶酶原激活因子 克隆 原核表达
年,卷(期) 2009,(4) 所属期刊栏目 实验研究论著
研究方向 页码范围 389-391
页数 3页 分类号 R698.2
字数 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 邱峰 广东省中医院检验科 27 136 7.0 10.0
2 刘振杰 广东省中医院检验科 52 229 8.0 14.0
3 陈富 广东省中医院检验科 25 69 4.0 6.0
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尿激酶型纤溶酶原激活因子
克隆
原核表达
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热带医学杂志
月刊
1672-3619
44-1503/R
大16开
广州市中山二路74号中山医学院
1979
chi
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