携带人尿激酶原cDNA的重组腺病毒载体的构建及其在体内的表达

• 作者: 丁金凤 刘冬青 刘嵩凯
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 尿激酶原 腺病毒 基因转移
• 年，卷（期）: 1999,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 425-430
• 页数: 6页
• 分类号: R541.4|Q789
• 语种: 中文

摘要

目的构建表达人尿激酶原的重组腺病毒载体,为临床基因治疗提供实验依据.方法采用亚克隆获得的pCA14-pro-UK重组质粒与质粒pJM1 7共转染培养的293细胞,经同源重组,得到含有pro-UK cDNA的重组腺病毒.扩增纯化后,局部转染经球囊损伤后的兔股动脉.7 d后,分别收集转染的血管段和对照血管段,以Western印迹和免疫组化检测表达.结果(1)经PCR扩增及体外感染A549细胞结果表明,获得了具有生物活性的含人pro-UK cDNA的重组腺病毒;(2)重组腺病毒的滴度为1×109噬菌斑形成单位/ml(PFU/m1);(3)免疫组化及Western印迹分析显示:重组腺病毒能在损伤的兔股动脉内膜表达尿激酶原.结论构建得到的携带人尿激酶原cDNA的重组腺病毒能在损伤血管部位表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘冬青	中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病研究所分子医学中心	6	14	3.0	3.0
2	丁金凤	中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病研究所分子医学中心	3	13	1.0	3.0
3	刘嵩凯	中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病研究所分子医学中心	1	0	0.0	0.0