Rel-A siRNA对大鼠树突状细胞的影响

• 作者: 周晓俊 宇汝胜 汪泳 秦磊 钱海鑫
• 来源期刊: 中国普通外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Rel-A RNA干扰 树突状细胞 基因表达
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 44-48
• 页数: 5页
• 分类号: R34-33
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨siRNA沉默Rel-A基因表达对大鼠树突状细胞(DC)生物学效应的影响.方法 采用细胞因子诱导培养法体外扩增大鼠骨髓DC,经免疫磁珠纯化获得高纯度DC后, 针对Rel-A基因,采用半定量RT-PCR及Western blot分别从mRNA和蛋白质水平检测Rel-A的表达情况,筛选一对高效RNA干扰(RNAi)行慢病毒载体包装并转染DC(RNA干扰组), 以未转染RNAi的DC作为对照组.分别给予1mg/L的脂多糖(LPS)刺激,透射电镜观察RNAi对LPS促DC成熟的影响,并利用流式细胞术(FCM)检测DC表面CD80,CD86及MHC Ⅱ分子的变化;混合淋巴细胞反应(MLR)法检测T细胞增殖能力;ELISA法检测DC分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ( IFN-γ)和白介素12( IL-12)的浓度.结果 与空白对照组相比, 序列2组降低最明显,抑制率达90%,差异有统计学意义;透射电镜下可见RNAi Rel-A DC内多吞噬泡样结构;RNA干扰组CD80,CD86,MHC Ⅱ分子的表达、T细胞增殖能力及TNF-α,IFN-γ,IL-12的浓度与对照组相比均显著下降. 结论 RNA干扰技术能显著下调大鼠Rel-A基因的表达, Rel-A基因沉默DC的生物学效应表现为未成熟DC的特点.这种RNAi Rel-A DC可望作为一种新型的致耐受DC,而应用于免疫耐受的诱导研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱海鑫	苏州大学第一附属医院普通外科	228	836	13.0	16.0
2	周晓俊	苏州大学第一附属医院普通外科	84	342	9.0	14.0
3	秦磊	苏州大学第一附属医院普通外科	93	364	10.0	13.0
4	汪泳	苏州大学第一附属医院普通外科	4	8	2.0	2.0
5	宇汝胜	苏州大学第一附属医院普通外科	4	8	2.0	2.0