乳牛子宫内膜抗菌肽BNBD5基因的克隆及其原核表达

• 作者: 严作廷 崔燕 王东升 王桂荣 米宝明
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 乳牛 子宫内膜抗菌肽 BNBD5基因 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 基础兽医学
• 页码范围: 538-542
• 页数: 5页
• 分类号: S859.797|Q786
• 字数: 4197字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2009.06.013

摘要

为研发防治乳牛子宫内膜炎的抗菌肽生物制剂,根据已发表的牛抗菌肽基因序列设计了1对引物,用试剂盒提取乳牛新鲜子宫内膜总RNA,经RT-PCR扩增,将克隆的抗菌肽BNBD5基因全长编码区的cDNA连接到原核表达载体pET30a中,经IPTG诱导原核表达,通过Western-blot检测融合蛋白BNBD5的表达水平.结果表明,RT-PCR扩增出的cDNA片段长138 bp,编码45个氨基酸的多肽,多肽中合6个保守半胱氨酸残基.用Blast程序进行检索比较显示,克隆出了牛防御素家族成员BNBD5基因,并成功构建了pET30a-BNBD5载体,经IPTG诱导,pET30a-BNBD5原核表达产物的相对分子质量约为10 ku,与预期的融合蛋白大小一致,证实构建的重组质粒能够在大肠杆菌中表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严作廷	中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所	66	389	10.0	18.0
2	王东升	中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所	49	208	9.0	12.0
3	崔燕	甘肃农业大学动物医学院	119	412	10.0	13.0
4	王桂荣	甘肃农业大学动物医学院	10	25	2.0	4.0
5	米宝明	甘肃农业大学动物医学院	3	16	2.0	3.0