SHIP基因诱导白血病细胞株K562凋亡及其机制

• 作者: 刘小军 姚丽 杜行严 杨敬慈 杨琳 温树鹏 罗建民
• 来源期刊: 生理学报
• 学科: 医学
• 关键词: SHIP 慢病毒表达系统 细胞增殖 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 146-154
• 页数: 9页
• 分类号: R733.7|R730.231
• 语种: 中文

摘要

肌醇5′磷酸酶(src homology 2 domain-containing inositol-5-phosphatase,SHIP)是继PTEN之后发现的又一肌醇磷酸酶,对造血细胞增殖有关键负调控作用.目前国内外对SHIP基因与人类肿瘤抑制关系方面的研究报道较少.本研究利用携带野生型SHIP基因的慢病毒表达载体稳定感染K562细胞,应用实时荧光PCR、Western blot检测转染前后细胞内SHIP基因mRNA和蛋白水平的变化,MTT测定细胞增殖水平的变化,ELISA检测相关激酶活性,TUNEL、Hoechst 33342检测细胞凋亡的变化,从而探讨SHIP基因诱导K562凋亡的机制,分析SHIP基因在白血病发病中的意义.结果如下:(1)K562细胞SHIP蛋白表达阴性;(2)携带野生型SHIP基因的慢病毒表达载体转染使K562细胞表达SHIP mRNA和蛋白;(3)与对照组相比,转染野生型SHIP基因导致K562细胞生长受抑,并出现明显的凋亡征象;(4)转染SHIP基因的K562细胞Akt磷酸化水平降低;NF-κB和bcl-xL表达降低;同时细胞促凋亡基因bad、p27表达和caspase-9、caspase-3活性明显增高.上述结果提示SHIP通过抑制P13K/Akt路径中Akt的磷酸化,促进其下游bad、p27表达和caspase-9、caspase-3的活化,抑制bcl-xL,最终诱导白血病细胞凋亡;另外,NF-κB表达下调也是SHIP抑制白血病细胞增殖并促进细胞凋亡的重要作用机制.