梅毒螺旋体Tp 0319重组蛋白的表达、纯化及其在临床诊断中的初步应用

• 作者: 伍宁 刘双全 吴移谋 肖勇健 赵飞俊
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 梅毒螺旋体 重组蛋白 血清学试验 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 252-255
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

目的 克隆、表达及纯化梅毒螺旋体(Tp)外膜蛋白Tp 0319,并建立间接ELISA方法,探讨其在梅毒血清学诊断中的价值.方法 构建重组质粒PQE32/Tp 0319,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和western blot鉴定表达结果;Ni-NTA亲和层析法纯化重组蛋白,间接ELISA检测梅毒患者血清中特异性IgG抗体.结果 成功构建了PQE32/Tp 0319重组质粒;经SDS-PAGE检测,诱导产物显示有一条相对分子质量约为30 000的特异蛋白质条带,western blot分析证明其只与人抗Tp IgG发生特异性反应;将Tp 0139用于间接ELISA检测抗Tp抗体阴、阳性参比血清,特异性和敏感性均为100%;检测梅毒患者和健康献血者血清各150份,结果与TPPA法符合率为95.3%.结论 制备的Tp 0319重组蛋白有较好的免疫反应性,可望用于临床梅毒血清学诊断.